Microsoft PowerPoint - FK3Anatgonist5HT2c.ppt [Samo za branje] [Združljivostni način]

Transkripcija

1 Iskanje idealnega anksiolitika Iskanje = načrtovanje, sineza in vrednotenje

2 Iskanje idealnega anksiolitika Kaj je idealni anksiolitik? Idealni anksiolitik: - ni sedativ, - per os uporabna učinkovina - nima interakcij z etanolom, - ima hiter nastop učinka, - ne vodi v odvisnost.

3 IZHODIŠČE: serotoninski sistem in receptorji za 5-HT bi bili lahko primerna tarča Ugotovitve: Receptor 5HT 2C sodeluje pri anksioznosti. Preko aktivacije teh receptorjev se pojavi anksioznost. 5HT 2B so na periferiji 5HT 2C so v CŽS

4 IZHODIŠČE: serotoninski sistem in receptorji za 5-HT bi bili lahko primerna tarča Ugotovitve: Receptor 5HT 2C sodeluje pri anksioznosti Cilj: selektivni 5HT 2C antagonist

5 Ugotovitve: ašli spojino, ki deluje na 5HT 2B/2C m-cpp m-cpp ima določeno selektivnost do 5HT 2B in 5HT 2C Selektivnost pomeni, da ne deluje na 5HT 2A Spojina m-cpp je agonist na 5HT 2B in 5HT 2C Povzroča anksioznost, spojina je prepovedana

6 Ugotovitve: ašli spojino, ki deluje na 5HT 2B/2C m-cpp m-cpp ima določeno selektivnost do 5HT 2B in 5HT 2C m-cpp je dokaz, da je možen učinek le na 5HT 2B in 5HT 2C

7 Priprava orodij za dosego cilja A: testni sistem Pridobitev gena (plazmid) za: 5HT 2A, 5HT 2B in 5HT 2C Kloniranje receptorjev: 5HT 2A, 5HT 2B, 5HT 2C. in izražanje v hitro rastočih celicah.

8 Priprava orodij za dosego cilja B: in vitro testni modeli vezava (afiniteta) na klonirane receptorje 5HT 2A, 5HT 2B, 5HT 2C Afiniteta: izpodrinjanje vezanega radioaktivnega liganda iz receptorja Radioaktivni ligand: 5HT *

9 Priprava orodij za dosego cilja B: in vitro testni modeli inhibitorno delovanje na CytP 450 encime Sprotno ugotavljanje ali učinkovina moti metabolizem, ki ga katalizirajo CytP 450 encimi.

10 Priprava orodij za dosego cilja C: in vivo testni modeli: - na podganah ugotavljali preprečitev hipoaktivnosti, ki jo povzroča m-cpp M-CPP je agonist na 5HT 2B/2C CILJ je antagonsit na 5HT 2C

11 Spojina vodnica: Lilly Pharmaceuticals H H O CF 3 Iščemo učinkovino z antagonističnim delovanjem na 5HT 2C

12 Spojina vodnica: Lilly Pharmaceuticals H H O CF 3 Spojina netopna v vodi Prvi delni cilj: povečanje topnosti

13 Spojina vodnica: Lilly Pharmaceuticals H H O CF 3 A B C SAR

14 Spojina vodnica: Lilly Pharmaceuticals H H CF 3 O SAR A B C poenostavitev spremembe brez sprememb

15 H H SB O ova in boljša spojina vodnica

16 H H SB O Prvi selektivni 5HT 2B/2C antagonist: 50 krat manjša afiniteta do 5HT 2A Tudi nekaj p/o aktivnosti.

17 H H SB O Prvi selektivni 5HT 2B/2C antagonist: 50 krat manjša afiniteta do 5HT 2A Tudi nekaj p/os aktivnosti. Kako še povečati afiniteto?

18 H H SB O Prvi selektivni 5HT 2B/2C antagonist: 50 krat manjša afiniteta do 5HT 2A Tudi nekaj p/os aktivnosti. Kako še povečati afiniteto? Drugi vmesni cilj: omejiti konformacijski prostor SB !

19 A =1,2 B

20 A n=1 n=2

21 n=1 A Če je n=2, je afiniteta manjša, kot pri n=1. n=2

22 n=1 A Če je n=1, je struktura planarna, pri n=2 pa I! n=2

23 HIPOTEZA Planarne spojine ugodneje interagirajo z receptorjem 5HT 2B/2C

24 HIPOTEZA (1) Planarne spojine ugodneje interagirajo z receptorjem 5HT 2B/2C Serija B je dala učinkovitejše spojine 10 krat večja afiniteta do 5HT 2B/2C kot SB krat večja afiniteta do 5HT 2B/2C kot do 5HT 2A 4 krat močnejši in vivo anksiolitik. SB

25 Metabolizem SB demetiliranje

26 Metabolizem SB demetiliranje Pogled v bodočnost

27 Metabolizem -demetiliranje Metabolit je še vedno aktiven, vendar brez selektivnosti!

28 H O HIPOTEZA (2): Premik metilne skupine

29 H O Rezultati: v vseh primerih pade afiniteta in selektivnost Slaba hipoteza

30 H O Rezultati: v vseh primerih pade afiniteta in selektivnost Slaba hipoteza Odstranitev metilne skupine: izguba afinitete! Metilna skupina je potrebna!

31 H O R 1 = -CH 3 -CH 2 CH 3 -CH 2 CH 2 CH 3 R 1 Rezultat: podobna afiniteta do 5HT 2C nekoliko večja selektivnost. R 1 = -CH 2 -C 6 H 5 Padec afinitete in padec selektivnosti! H O SUBSTITUCIJA A TEH MESTIH JE EUGODA R 1

32 ova faza: bioizosterne zamenjave H O Dobra aktivnost vendar samo i/v O H O H O Izguba selektivnosti S

33 Delni rezultati: - množica spojin: napravili SAR, napravili modele receptorjev izvedli prileganja. Ugotovitev: -metilna skupina ključna za 5HT 2C selektivnost! -karbonilna skupina sečninskega dela: H vezi -piridinski obroč in triciklični sistem: hidrofobne interakcije

34 ova hipoteza Metilno skupino nadomestiti z nečem drugim in posledično odstraniti pirolov obroč (biciklični sistem)

35 H O IDOLII Y X X Y FEIL SEČIE

36 H O IDOLII Y X Sintezno zahtevne spojine Množica spojin Y X FEIL SEČIE Sintezno lažje dostopne

37 Sinteza sečnin:

38 Rezultati: Ugodni učinki, če je: R 3 = -Cl, -CF 3 in R 4 = -SCH 3, -OCH 3 Te substituente prenesli na indoline

39 SB Zelo dober antagonist na 5HT 2B/2C Visoka selektivnost Dober anksiolitik

40 H O

41 SB Zelo dober antagonist na 5HT 2B/2C Visoka selektivnost Dober anksiolitik Slaba stran: inhibitor CytP 450

42 Ta dela molekule sta v istem hidrofobnem žepu Oviranje rotacije

43 Verjetnejša konformacija Dodatna ugotovitev: v hidrofobnem žepu je veliko prostora Dodali nov obroč

44

45 Problem: neovirana vrtljivost

46 Metilna skupina poveča selektivnost Afiniteta ostane nespremenjena, če SCH 3 zamenjamo z -OCH 3.

47 Dodatek metilne skupine: večja afiniteta do 5HT 2C Spojina malo p/o aktivna, še vedno inhibitor CytP 450

48 Kaj je v molekuli krivo za inhibicijo CytP 450 CH 3 H O CF 3 OCH 3

49 Kaj je v molekuli vzrok za inhibicijo CytP 450? CH 3 H O CF 3 OCH 3 Začeli s proučevanjem tega dela molekule Domneva: piridinski obroč odogovoren za inhibicijo.

50 Sprememba: en piridinski obroč manj H O CF 3 OCH 3 CH 3 Rezultat: večja afiniteta večja selektivnost p/o aktivnost še vedno inhibitor CytP

51 Preprečili rotacijo Rezultat: povečanje afinitete povečanje selektivnosti dobra p/o aktivnost ni več inhibitor CytP 450 Zelo kratek čas delovanja zaradi metabolizma! Študij metabolizma

52 Intenzivna uporaba molekulskega modeliranja je dala novo strukturo Še večja selektivnost Uporabnost p/o Ugotove O demetiliranje

53 Še zadnje stopnja KLIIČO TESTIRAJE SB Selektivni antagonist na 5HT 2C p/o in nesedativni anksiolitik

54 Ser-138 OH Ser-141 HO Phe-220 Trp-324 Phe-327Phe-328 H O O CF 3 Val-608 CH 3 Phe-224 CH 3 Phe-223 Val-212