ALL TEST COVID-19 Ag HITRI TEST s kontrolami REF ICOV-502 HC-ICOV-502-PN

NAVODILO ZA UPORABO ALL TEST COVID-19 Ag HITRI TEST s kontrolami REF ICOV-502 HC-ICOV-502-PN Za hitro in kvalitativno odkrivanje antigenov SARS-CoV-2 prisotnih v človeškem nazofarinksu. Samo za profesionalno in-vitro diagnostično uporabo. Navodila za rokovanje s setom (prevod originalnih navodil). Pred uporabo dobro preberi tudi originalna navodila. Navodila za uporabo seta naj bodo zmeraj v bližini izvajalca testa. 1

Vsebina PREDVIDENA UPORABA... 3 POVZETEK... 3 PRINCIP DELOVANJA... 3 REAGENTI... 3 VARNOSTNA OPOZORILA... 4 SHRANJEVANJE IN STABILNOST... 4 ZBIRANJE VZORCA, TRANSPORT IN SHRANJEVANJE... 4 Zbiranje vzorca... 4 Transport in shranjevanje vzorcev... 4 PRIPRAVA VZORCA... 5 MATERIALI... 5 V setu... 5 Dodatno potrebni, a ne v setu... 5 NAVODILA ZA UPORABO... 5 INTERPRETACIJA REZULTATOV... 6 KONTROLA KVALITETE... 6 Interna kontrola kvalitete... 6 Eksterna kontrola kvalitete... 6 OMEJITVE... 7 PRIČAKOVANE VREDNOSTI... 7 KARAKTERISTIKE... 7 Občutljivost, specifičnost in točnost... 7 Testiranje specifičnosti z različnimi virusnimi sevi... 8 NATANČNOST (PRECIZNOST)... 9 Ponovljivost znotraj & zunaj... 9 NAVZKRIŽNA REAKTIVNOST... 9 VIRI... 9 Kazalo simbolov... 9 2

PREDVIDENA UPORABA COVID-19 Antigen Rapid Test (nazofaringealni bris) je hitri kromatografski imunološki test za kvalitativno odkrivanje antigenov SARS-CoV-2 v vzorcih nazofaringealnih brisov posameznikov s sumom na okužbo s SARS-CoV-2 v povezavi s klinično predstavitvijo in rezultati druge laboratorijske preiskave. Rezultati so za odkrivanje antigenov SARS-CoV-2. Antigen je običajno mogoče zaznati v akutni fazi okužbe v vzorcih zgornjih dihal. Pozitivni rezultati kažejo na prisotnost virusnih antigenov, vendar je za določitev stanja okužbe potrebna klinična korelacija z anamnezo bolnika in drugimi diagnostičnimi informacijami. Pozitivni rezultati ne izključujejo bakterijske okužbe ali sočasne okužbe z drugimi virusi. Odkriti povzročitelj morda ni edini oz. dokončni vzrok bolezni. Negativni rezultati ne izključujejo okužbe s SARS-CoV-2 in se ne smejo uporabljati kot edina osnova za zdravljenje ali odločanje o vodenju bolnika. Negativne rezultate je potrebno obravnavati kot domnevne in jih potrditi z molekularnim testom za morebitno vodenje bolnika. Negativne rezultate je treba upoštevati v kontekstu nedavne izpostavljenosti pacienta, anamneze in prisotnosti kliničnih znakov in simptomov, skladnih s COVID-19. COVID-19 Antigen Rapid Test je namenjen uporabi usposobljenega osebja kliničnih laboratorijev. POVZETEK Novi korona virusi spadajo v rod β. COVID-19 je akutna respiratorna nalezljiva bolezen. Ljudje so na splošno dovzetni. Trenutno so bolniki, okuženi z novim korona virusom, glavni vir okužb; tudi asimptomatski okuženi ljudje so lahko vir okužbe. Na podlagi trenutne epidemiološke preiskave je inkubacijsko obdobje od 1 do 14 dni, večinoma od 3 do 7 dni. Glavne manifestacije vključujejo vročino, utrujenost in suh kašelj. V nekaj primerih se je manifestirala nosna kongestija, izcedek iz nosu, vneto grlo, mialgija in driska. PRINCIP DELOVANJA COVID-19 Antigen Rapid Test (bris nazofarinksa) je kvalitativni membranski imunološki test za odkrivanje antigenov SARS-CoV-2 v vzorcu brisa nazofarinksa. V območju testne črte je nanešeno protitelo SARS- CoV-2. Med postopkom testiranja vzorec reagira z delci, ki imajo nanešena protitelesa SARS-CoV-2. Kompleks nato s kapilarnim delovanjem migrira navzgor po membrani in reagira s protitelesi v območju testne linije. Če vzorec vsebuje antigene SARS-CoV-2, se v območju testne črte pojavi barvna črta. Če vzorec ne vsebuje antigenov za SARS-CoV-2, se v območju testne črte ne pojavi barvna črta, kar kaže na negativen rezultat. Test ima notranjo kontrolo, ki služi kot postopkovna kontrola: v območju kontrolne črte se mora pojaviti obarvana črta, kar pomeni, da je bila dodana ustrezna količina vzorca in da je bil primeren kapilarni vlek. REAGENTI Test vsebuje anti-sars-cov-2 protitelesa kot nanešen reagent, anti-sars-cov-2 protitelesa pa kot detekcijski reagent. 3

VARNOSTNA OPOZORILA 1. Ta navodila za delo morate v celoti prebrati preden izvedete test. Neupoštevanje Navodil za delo je lahko vzrok napačnega rezultata testa. 2. Namenjeno samo za profesionalno in vitro diagnostiko. Ne uporabljajte po datumu izteka roka uporabnosti. 3. Ne jejte, ne pite in ne kadite v območju rokovanja z vzorci in testnimi kompleti. 4. Ne uporabite testa, če je testna embalaža poškodovana. 5. Vsi vzorci so potencialno nevarni, zato z njimi ravnajte enako kot s kužnimi snovmi. Upoštevajte uveljavljene previdnostne ukrepe proti mikrobiološkim tveganjem v vseh postopkih (zbiranju, ravnanju in shranjevanju vzorcev bolnika) in upoštevajte standardne postopke za pravilno odstranjevanje vzorcev bolnikov in uporabljene vsebine seta. 6. Uporabljajte zaščitna oblačila, kot so laboratorijske halje, rokavice za enkratno uporabo in zaščitna očala med delom. 7. Umite roke po končanem postopku. 8. Prosimo, zagotovite, da se za testiranje uporabi ustrezna količina vzorca. Preveč ali premalo vzorca lahko povzroči odstopanje rezultatov. 9. Virusni transportni medij (VTM) lahko vpliva na rezultat; ekstrahirani vzorci za PCR test, niso primerni za uporabo tega testa. 10. Uporabljene teste je potrebno zavreči v skladu z lokalno zakonodajo in predpisi. 11. Vlažnost in temperatura lahko negativno vplivata na rezultate. SHRANJEVANJE IN STABILNOST Shranjujte v originalni embalaži pri sobni temperaturi ali v hladilniku (2-30 C). Test je stabilen do datuma uporabnosti, ki je odtisnjen na embalaži. Test mora ostati v zaprti embalaži do uporabe. NE ZAMRZUJTE. Ne uporabljajte po preteku roka uporabnosti. ZBIRANJE VZORCA, TRANSPORT IN SHRANJEVANJE Zbiranje vzorca 1. Sterilni bris vstavite v nosnico pacienta in ga potisnite tako globoko, da doseže zadnjo steno nosno-žrelnega predela. 2. Na skrajni točki nekajkrat bris nežno zavrtite okoli osi. 3. Izvlecite bris iz nosne votline. Transport in shranjevanje vzorcev Vzorec brisa je potrebno testirati čim prej po odvzemu. V kolikor brisa ne nameravate testirati takoj, ga je potrebno shraniti v suho, sterilno in tesno zatesnjeno plastično epruveto. Vzorec brisa, hranjen v sterilnih in suhih pogojih, je stabilen do 8 ur na sobni temperaturi in do 24 ur pri 2-8 C. 4

PRIPRAVA VZORCA Za pripravo vzorcev se lahko uporabljajo samo epruvete in ekstrakcijski pufer iz kompleta. Za podrobne informacije o ekstrakciji vzorca glejte Kartico z opisom postopka. 1. Vstavite vzorec brisa v priloženo epruveto (približno 350μl). Pritisnite na notranjo steno epruvete in mešajte palčko z vzorcem brisa približno 10 sekund, medtem ko pritiskate glavo brisa na notranjo steno epruvete, da sprostite antigene v zbiralno epruveto. 2. Odstranite bris, medtem ko stisnete epruveto, da iz njega iztisnete čim več tekočini. Zavrzite bris v skladu s svojim protokolom o odstranjevanju bioloških nevarnih odpadkov. * OPOZORILO: Ekstrahiran vzorec je stabilen do 2 uri na sobni temperaturi in 24 ur pri 2-8 C. MATERIALI V setu 20 testnih ploščic 20 epruvet z ekstrakcijskim pufrom 20 sterilnih brisov 1 pozitivna kontrola 1 negativna kontrola 1 navodila za uporabo 1 delovna postaja 1 kartica z opisom postopka Dodatno potrebni, a ne v setu Štoparica Pipeta NAVODILA ZA UPORABO Pred testiranjem testno ploščico, vzorec, pufer in/ali kontrole segrejte na sobno temperaturo (15-30 C). 1. Odstranite zaščitno embalažo s testne ploščice in jo uporabite znotraj ene ure. Najboljši rezultati so dobljeni, če se testna ploščica uporabi takoj po tem, ko je vzeta iz zaščitne embalaže. 2. Obrnite epruveto za zbiranje vzorcev, odvite mali zamašek in dodajte 3 kapljice ekstrahiranega vzorca (približno 100 μl) v vdolbino za vzorce (S) in nato vklopite štoparico. 3. Počakajte, da se pojavi(ta) barvna(i) črta(i). Rezultat preberite pri 15 minutah. Rezultata ne interpretirajte po 20 minutah. 5

INTERPRETACIJA REZULTATOV (Glejte ilustracijo zgoraj) POZITIVEN REZULTAT*: Pojavita se dve barvni črti. Ena barvna črta mora biti v območju kontrolne črte (C) in druga obarvana črta v testnem področju (T). Pozitiven rezultat na testnem območju pomeni določitev SARS-COV-2 antigenov v vzorcu. * OPOMBA: Intenzivnost barve v območju testne linije (T) je lahko različna glede na količino SARS-COV- 2 antigenov v vzorcu. Zato je treba vsako najmanjše obarvanje na območju testne črte šteti za pozitiven rezultat. NEGATIVEN REZULTAT: Pojavi se barvna črta v kontrolnem področju (C). V testnem območju (T) se črta ne pojavi. NEVELJAVEN REZULTAT: V kontrolnem področju (C) se črta ne pojavi. Najbolj pogosta vzroka za neveljaven rezultat sta premajhna količina vzorca in nepravilna izvedba testa. Preverite postopek in ponovite testiranje z novim testom. Če se napaka ponavlja, prenehajte z uporabo testa in obvestite vašega lokalnega dobavitelja. KONTROLA KVALITETE Interna kontrola kvalitete Notranje procesne kontrole so vključene v test. Barvna črta, ki se pojavi v kontrolnem področju (C) testne ploščice, velja kot notranja kontrola pravilne izvedbe testa. Potrjuje zadostno količino vzorca in pravilno postopkovno tehniko. Negativna notranja proceduralna kontrola je barva ozadja, ki naj bi ostala čista. V kolikor je test potekal pravilno, ostane ozadje v testnem območju bele barve do svetlo roza in ne sme ovirati sposobnosti branja testnega rezultata. Eksterna kontrola kvalitete Pozitivne / negativne kontrole so vključene v ta komplet v skladu z dobro laboratorijsko prakso in so priporočljive. POZITIVNA KONTROLA vsebuje liofiliziran prašek rekombinantnega SARS-COV-2 antigena in nekaj Proclin300 kot konzervans. NEGATIVNA KONTROLA je PBS. Navodila za izvajanje negativne in pozitivne kontrole: 1. Raztapljanje pozitivne kontrole: Odprite pokrovček epruvete pozitivne kontrole in vanjo dodajte 200μL negativne kontrole, nato zaprite pokrovček in dobro premešajte raztopino. Opomba: Raztopljena pozitivna kontrola je stabilna 1 dan pri 2 do 8 C 1. Postavite testno ploščico na čisto in ravno površino, nato odprite pokrovček tube NEGATIVNE KONTROLE ali tube raztopljene POZITIVNE KONTROLE. 2. Držite pipeto navpično in v vdolbino za vzorce (S) nanesite 3 kapljice (100 μl) negativne ali raztopljene pozitivne kontrole in zaženite štoparico. 3. Počakajte, da se prikažejo barvne črte. Rezultat odčitajte po 15 minutah. Rezultata ne interpretirajte po 20 minutah. 4. Pozitivna kontrola mora dati pozitivne rezultate, negativna kontrola pa negativne. Če kontrole ne prikažejo pričakovanih rezultatov, testov ne uporabljajte. Ponovite test kontrole ali se obrnite na vašega distributerja. 6

OMEJITVE 1. Ko testirate na prisotnost SARS-CoV-2 antigenov v vzorcu brisa nasofarinksa pri osumljenih osebah, je treba natančno upoštevati testni postopek in razlago rezultata testa. Za optimalno izvedbo testa je ključnega pomena pravilno odvzet vzorec. Če ne upoštevate postopka, lahko dobite napačne rezultate. 2. Učinkovitost COVID-19 Antigen Rapid Test (bris nazofarinksa) je bila ocenjena s postopki, ki so navedeni v teh navodilih za delo. Spremembe opisanih postopkov lahko spremenijo uspešnost/učinkovitost testa. Virusni transportni mediji (VTM) lahko vplivajo na rezultat testa; Ekstrahiranih vzorcev za PCR teste ni mogoče uporabiti za test. 3. COVID-19 Antigen Rapid Test (bris nazofarinksa) je namenjen samo za in vitro diagnostično uporabo, in sicer za odkrivanje SARS-CoV-2 antigenov v vzorcih nazofarinksa kot pomoč pri diagnosticiranju bolnikov s sumom na SARS-CoV-2 okužbo, v povezavi s klinično sliko in rezultati drugih laboratorijskih testov. S tem kvalitativnim testom ni mogoče določiti niti količinske vrednosti niti stopnje povečanja koncentracije SARS-CoV-2 antigenov. 4. COVID-19 Antigen Rapid Test (bris nazofarinksa) pokaže le prisotnost SARS-CoV-2 antigenov v vzorcu in se ne sme uporabljati kot edino merilo za diagnozo okužbe z SARS-CoV-2. 5. Kot pri vseh diagnostičnih testih, je potrebno rezultate, pridobljene s testom, upoštevati v kombinaciji z drugimi kliničnimi ugotovitvami in rezultati drugih laboratorijskih testov in ocen. 6. Če je rezultat testa negativen ali nereaktiven, klinični simptomi pa obstajajo, je priporočljivo, da bolnika nekaj dni kasneje ponovno testirate ali ga testirate z molekularno metodo, da izključite okužbo pri tem posamezniku. 7. Test bo pokazal negativen rezultat pod naslednjimi pogoji: Titer antigenov novega korona virusa v vzorcu je nižji od meje zaznave testa. 8. Negativni rezultati ne izključujejo okužbe s SARS-CoV-2, zlasti pri tistih, ki so bili v stiku z virusom. Za izključitev okužbe pri teh osebah je treba upoštevati nadaljnje testiranje z molekularno diagnostiko. 9. Presežek krvi ali mucina na brisu vzorca lahko moti izvedbo testa in lahko povzroči lažno pozitiven rezultat. 10. Natančnost testa je odvisna od kakovosti odvzema vzorca brisa. Lažno negativni rezultati so lahko posledica neustreznega zbiranja ali shranjevanja vzorcev. 11. Pozitivni rezultati COVID-19 so lahko posledica okužbe s sevi koronavirusa, ki niso SARS-CoV-2 ali drugimi interferenčnimi dejavniki. PRIČAKOVANE VREDNOSTI COVID-19 Antigen Rapid Test (bris nazofarinksa) je bil primerjan z vodilnim komercialnim RT-PCR testom. Korelacija med testoma je 98%. KARAKTERISTIKE Občutljivost, specifičnost in točnost COVID-19 Antigen Rapid Test (bris nazofarinksa) je bil evalviran na vzorcih bolnikov. Kot referenčno metodo se je vzelo RT-PCR. Vzorci so bili smatrani kot pozitivni, če je bil rezultat RT-PCR metode pozitiven, in negativni, če je bil rezultat z RT-PCR metodo negativen. 7

Vzorec: bris nazofarinksa COVID-19 Antigen Hitri Test COVID-19 Antigen *Interval zaupanja Pozitivno RT-PCR Negativno Skupaj Pozitivno 80 1 81 Negativno 3 120 123 Skupaj 83 121 204 Relativna občutljivost 96,4% (95%CI*: 89.8%~99.2%) Relativna specifičnost 99,2% (95%CI*: 95.5%~99.9%) Točnost 98,0% (95%CI*: 95.1%~99.5%) Testiranje specifičnosti z različnimi virusnimi sevi COVID-19 Antigen Rapid Test (bris nazofarinksa) je bil testiran s spodaj naštetimi virusnimi sevi pri navedenih koncentracijah ter ni dal nobene zaznavne črte. Opis Adenovirus type 3 Adenovirus type 7 Human coronavirus OC43 Influenza A H1N1 Influenza A H3N2 Influenza B Human Rhinovirus 2 Human Rhinovirus 14 Human Rhinovirus 16 Measles Mumps Parainfluenza virus 2 Parainfluenza virus 3 Respiratory syncytial virus Testni nivo 3.16 x 10 4 TCID50/ml 1.58 x 10 5 TCID50/ml 2.45 x 10 6 LD50/ml 3.16 x 10 5 TCID50/ml 1 x 10 5 TCID50/ml 3.16 x 10 6 TCID50/ml 2.81 x 10 4 TCID50/ml 1.58 x 10 6 TCID50/ml 8.89 x 10 6 TCID50/ml 1.58 x 10 4 TCID50/ml 1.58 x 10 4 TCID50/ml 1.58 x 10 7 TCID50/ml 1.58 x 10 8 TCID50/ml 8.89 x 10 4 TCID50/ml TCID50= Tissue Culture Infectious Dose 50 je razredčitev virusa, ki okuži 50% celic na inokuliranih gojiščih. LD50= Lethal Dose 50 je razredčitev virusa, ki pokončna 50% inokuliranih dojenih miši. 8

NATANČNOST (PRECIZNOST) Ponovljivost znotraj & zunaj Natančnost je bila določena z uporabo treh vzorcev COVID-19 standarde kontrole. Testirali so tri različne lote COVID-19 Antigen Rapid Test (bris nazofarinksa) z uporabo negativne, SARS-CoV-2 antigen šibke in SARS-CoV-2 antigen močne. Naredili so deset ponovitev vsakega nivoja v treh zaporednih dneh. Vzorci so bili pravilno identificirani > 99%. NAVZKRIŽNA REAKTIVNOST Organizmi, navedeni v spodnji tabeli, so bili testirani z 1.0x10 8 org / ml in vsi so bili pri testiranju s hitrim testom COVID-19 (nazofaringealni bris) negativni.: Arcanobacterium Candida albicans Corynebacterium Escherichia coli Moraxella catarrhalis Neisseria lactamica Nesseria subllava Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus subspaureus Staphylococcus epidermidis Streptococcus pneumoniae Streptococcus pygenes Streptococcus salivarius Streptococcus sp group F VIRI 1. Westgard JO, Barry PL,Hunt MR, Groth T. A multi-rule Shewhart for quality control in clinical chemistry, Clinical Chemistry 1981;27:493-501 Kazalo simbolov Le za in vitro diagnostično uporabo Hraniti pri temperaturi med 2-30 C Število testov v kompletu Uporaba do Pooblaščeni zastopnik Ni za večkratno uporabo Ne uporabljajte, če je embalaža poškodovana Lot številka Kataloška številka Proizvajalec Poizvedba v Navodilih za uporabo Številka: 146360400 Datum dokumenta: 2020-11-18 Distributer za Slovenijo: Mikro + Polo d.o.o., Zagrebška cesta 22, 2000 Maribor 9